革兰染色液

【产品名称】

通用名称：革兰染色液

英文名称：Gram Stain

【包装规格】

10ml×100瓶/盒、50ml×20瓶/盒、100ml×20瓶/盒、250ml×20瓶/盒、500ml×20瓶/盒、1000ml×10瓶/盒、5000ml/瓶、10L/瓶。

【预期用途】

用于细菌或真菌的涂片染色。

【主要组成成分】

本品由Ⅰ结晶紫染液（内含结晶紫、乙醇、草酸铵）；Ⅱ碘液（内含碘、碘化钾）；Ⅲ脱色液（内含95%乙醇）；Ⅳ复染液（内含沙黄、乙醇）组成。

【储存条件及有效期】

密封室温保存。有效期12个月。

【染色原理】

革兰氏染色法(Gram stain)是由丹麦医师革兰（Gram）氏于1884年所创立，当时发现革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次较多且交联致密，经革兰氏染色后能将结晶紫与碘的复合物牢固留在壁内，不容易被脱色液脱掉而仍呈紫色，在此基础上形成了革兰氏染色液试剂。

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

【操作步骤】

1 涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10ul待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂布成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。

2 干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烤枯而变形。

3 固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒种，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉过烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。

4 初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

5 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

6 媒染：用100-1000ul移液枪吸取约300ul碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

7 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

8 脱色：斜置载玻片，滴加95%乙醇脱色，至流出的乙醇不现紫色为止，大约需时20-30S，随即水洗。

9 复染：在涂片薄膜上滴加沙黄染液1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约1min。

10 水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。

11 干燥、观察：用吸水纸吸掉水滴，待标本片干后置显微镜下，用低倍镜观察，发现目的物后滴一滴浸油在玻片上，

【染色结果】

用油镜观察细菌的形态及颜色，紫色的是革兰氏阳性菌，红色的是革兰氏阴性菌。

【注意事项】

1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2.产品过期、浑浊或发现漏液现象禁止使用。

【生产企业】

企业名称：武汉雅冠生物科技有限公司

地址：湖北省鄂州市华容区华容创业园9号路武汉千叶鞋业有限公司厂房三楼

邮政编码：436000

客服电话：4000270025

网址：www.whagro.com

【生产企业许可证编号】

鄂鄂药监械生产备 20220007号

【备案证编号】

鄂鄂药监械生产备20230038